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潤肺消積膠囊對小鼠肺癌治療作用的實驗研究
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【摘要】目的:探討潤肺消積膠囊對小鼠肺癌的治療作用,為中藥對腫瘤的治療作用的進(jìn)一步研究提供實驗依據(jù)。方法:本研究將60只小鼠隨機(jī)分為6組,分別給予不同的處理,運(yùn)用Lewis肺癌小鼠模型,觀察潤肺消積膠囊對小鼠體重、腫瘤重量、生長抑制率、生存期的影響。結(jié)果:復(fù)方潤肺消積膠囊治療小鼠肺癌,能夠抑制腫瘤的生長,延長生存時間,改善小鼠生活質(zhì)量。結(jié)論:潤肺消積膠囊對小鼠Lewis肺癌具有良好的治療作用。
【關(guān)鍵詞】肺癌;潤肺消積膠囊;實驗研究
肺癌是目前死亡率和發(fā)病率均最高,對人類生命健康具有最大危害性的惡性腫瘤之一,對西藥、化療、放療的敏感性均較差,目前尚沒有治療肺癌的特效藥物。所以,目前腫瘤治療工作的重心仍然是尋找和發(fā)現(xiàn)對腫瘤治療效果較好的藥物。中藥是具有中國特色的治療疾病的方法。中藥尤其是中藥復(fù)方在中醫(yī)基礎(chǔ)理論的指導(dǎo)下,通過君臣佐使合理配伍,其活性物質(zhì)群可能作用于各個水平的多環(huán)節(jié),多靶點(diǎn)且安全性強(qiáng),具有較強(qiáng)的優(yōu)勢。本研究以中醫(yī)辨證論治理論為基礎(chǔ),探討復(fù)方潤肺消積膠囊對肺癌的治療作用,從而為中西醫(yī)結(jié)合治療肺癌探索新途徑并提供理論依據(jù)。
1 資料與方法
1.1 實驗動物選用的C57BL/6N小鼠(6周齡,雄性,體重16-20g)均購自黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心。Lewis肺癌荷瘤小鼠購自哈爾濱醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院)實驗動物中心。
1.2 藥物與試劑
潤肺消積膠囊:方藥主要組成有太子參、黃芪、牡丹皮、莪術(shù)、白花蛇舌草、山慈菇、茯苓、麥冬、天花粉、地骨皮等(中藥飲片均購自黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院中藥局),以臨床配伍方法,按傳統(tǒng)方法粉碎為散劑。
具體方法參照《中醫(yī)科研設(shè)計與統(tǒng)計方法》執(zhí)行。西藥1:順鉑注射液;西藥2:生理鹽水。
1.3 實驗儀器
醫(yī)用超凈工作臺(SW-GIF,中國蘇州凈化設(shè)備廠);高速冷凍離心機(jī)(R21,日本日立制作所);二氧化碳培養(yǎng)箱(2300,美國謝爾登公司);倒置生物顯微鏡(日本OLYMPU產(chǎn)品);光學(xué)顯微鏡(中國光學(xué)儀器廠);電熱恒溫水浴箱(北京醫(yī)療設(shè)備廠);y-放射免疫計數(shù)器(QC-911,中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)中佳公司);液閃測量儀(BECKMAN公司)。
1.4 方法及分組
①潤肺消積膠囊組方研究本方以益氣養(yǎng)陰、潤肺化痰、散積消徵為組方原則,體現(xiàn)祛邪與扶正相通,功補(bǔ)兼施的治療原則。藥物組成為太子參、黃芪、牡丹皮、莪術(shù)、白花蛇舌草、山慈菇、茯苓、麥冬、天花粉、地骨皮等。
、跐櫡蜗e膠囊高中低劑量的制備高中低劑量的制備分別按成人(60千克體重)臨床用藥的20、10、5倍,即分別按17.92g/kg、8.96g/kg、4.48g/kg給藥。然后將所取中藥進(jìn)行濃縮制成湯劑。
、墼炷7椒
將lewis肺癌細(xì)胞株進(jìn)行人工培養(yǎng),制成癌細(xì)胞懸液,取小鼠皮下注射癌細(xì)胞懸液建立肺癌小鼠移植瘤模型。
、軐嶒灧纸M
將所制成的移植瘤模型鼠隨機(jī)分為5組,每組10只,即:模型對照組、高劑量給藥組、中劑量給藥組、低劑量給藥組、西藥化療組;另選未建模10只小鼠作為正常組。
⑤潤肺消積膠囊治療肺癌模型小鼠造模后第6天開始給藥,模型對照組給予生理鹽水,按10ml/kg灌胃;低中高劑量組分別給予0.5ml湯劑,早晚給每天二次;西藥組按25mg/kg用生理鹽水配成,給予0.2ml,每天一次給5天。療程均為14d。第15天觀察小鼠體重變化,各組分別處死小鼠5只,取出各組處死的荷瘤小鼠瘤體的重量,稱重后再計算出各組小鼠的腫瘤生長抑制率。
1.5 統(tǒng)計學(xué)處理
計量資料X±SD表示,兩樣本均數(shù)的比較用t檢驗。用SPSS13.0統(tǒng)計軟件,對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。
2 結(jié)果
2.1 潤肺消積膠囊對肺癌小鼠體重的影響(見表1)
注:*表示與模型對照組比較,P<0.05;#表示與西藥化療組比較,P<0.05.
由表1可見,中藥低劑量給藥組、中劑量給藥組、高劑量給藥組的小鼠體重均大于模型對照組,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗,低、中、高劑量給藥組與模型對照組的差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);西藥化療組小鼠體重低于模型對照組,且兩者差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
2.2 潤肺消積膠囊對小鼠腫瘤重量及生長抑制率的影響(見表2)表2潤肺消積膠囊對小鼠腫瘤重量及生長抑制率的影響 (χ±s)
注:*表示與模型對照組比較,P<0.05;#表示與西藥化療組比較,P<0.05。A=對照組瘤重,B=實驗組瘤重,每組抑瘤率(%)=(A-B)/A×100%。
2.2.1 由表2可知,潤肺消積膠囊低劑量給藥組、中劑量給藥組、高劑量給藥組、西藥化療組的核瘤小鼠的瘤重均與小于不給與任何治療措施的模型對照組小鼠的瘤重,且經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗,在a=0.05水平上,差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。2.22低劑量給藥組的瘤重低于西藥化療組,且兩組差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
2.2.2 潤肺消積膠囊高劑量給藥組小鼠的瘤重低于西藥化療組,且兩組瘤重差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
2.2.3 低劑量給藥組、中劑量給藥組、高劑量給藥組小鼠的瘤重依次減少,且三者差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
2.3.2 低劑量給藥組、低劑量給藥組、低劑量給藥組、西藥化療組核瘤小鼠的存活時間均大于模型對照組小鼠的存活時間,且四組治療組與模型對照組小鼠的存活時間差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
2.3.3 低劑量給藥組、中劑量給藥組、高劑量給藥組小鼠的存活時間依次減少,且三者差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),說明在劑量允許的范圍內(nèi),潤消積膠囊的給藥量與小鼠的存活時間呈正相關(guān)。
2.3.4 高劑量給藥組小鼠的存活時間高于西藥化療組,且差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
3 討論
目前,Lewis肺癌常作為篩選抗腫瘤藥物的動物模型[2]。
本實驗研究把潤肺消積膠囊作為Lewis肺癌小鼠的治療藥物,探討復(fù)方潤肺消積膠囊對小鼠肺癌的治療作用。潤肺消積膠囊是一種在臨床上取得了較好療效的藥物,具有扶正固本、益氣養(yǎng)血的效果,對腫瘤有較好的抑制效果,。其中的人參、黃芪等補(bǔ)氣健脾藥物可調(diào)節(jié)腫瘤患者的免疫機(jī)能[3],從而達(dá)到抑制肺癌組織增長的效果。
本研究的實驗結(jié)果顯示,復(fù)方潤肺消積膠囊能夠有效提升Lewis肺癌小鼠的體重,較傳統(tǒng)的西藥化療治療有了明顯的改觀,取得了良好的效果。
中藥潤肺消積膠囊能夠有效的抑制小鼠肺癌細(xì)胞的增長,減輕腫瘤的重量,從而達(dá)到良好的治療肺癌的效果,低劑量給藥組、中劑量給藥組、高劑量給藥組小鼠的瘤重依次減少,說明在劑量允許的范圍,高劑量藥物的治療效果比低劑量的治療效果要好。
延長癌癥患者的生存時間是臨床治療的一項重要治療指標(biāo)。潤肺消積膠囊能延長肺癌小鼠的存活時間,高劑量給藥組小鼠的生存時間長于西藥組,說明高劑量的潤肺消積膠囊比順鉑注射液更有利于延長肺癌小鼠壽命。
綜上所述,潤肺消積膠囊能夠降低小鼠腫瘤的重量,提高腫瘤抑制率,延長Lewis肺癌小鼠的存活時間,增加小鼠的體重,提高生活質(zhì)量,對Lewis小鼠肺癌具有明顯的治療效果,從而為中西醫(yī)結(jié)合治療肺癌探索新途徑并提供理論依據(jù)。
參考文獻(xiàn)
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