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細(xì)菌L型培養(yǎng)基遴選研究
細(xì)菌L型培養(yǎng)基遴選研究，是小編為各位化學(xué)化工環(huán)境畢業(yè)的同學(xué)準(zhǔn)備的論文，歡迎大家參考!
摘要：目的：探討細(xì)菌L型培養(yǎng)基的應(yīng)用效果。方法：利用拉丁方試驗(yàn)方法將四種常見的細(xì)菌L型菌落接種到各種培養(yǎng)基中，觀察其生長(zhǎng)情況，選出最佳培養(yǎng)基。結(jié)果：培養(yǎng)基成分最優(yōu)組合為：10%卵黃鹽水、4%NaCl、0.8%瓊脂。結(jié)論：卵黃鹽水作為培養(yǎng)細(xì)菌L型的營(yíng)養(yǎng)成分最佳。
關(guān)鍵詞：細(xì)菌L型;培養(yǎng)基;卵黃懸液
細(xì)菌L培養(yǎng)基配方已有不少報(bào)道，所用營(yíng)養(yǎng)成分有人血漿、兔血漿、羊血漿、卵黃等，滲透壓有3%Nacl、4%Nacl、5%Nacl不等，還有用蔗糖調(diào)節(jié)滲透壓，瓊脂濃度有0.7%~1%不同濃度，且不少培養(yǎng)基為某一細(xì)菌L型所專用[1-2]。為選擇出適于多種細(xì)菌L型生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，我們利用四種常見致病菌與非致病菌包括球菌、桿菌經(jīng)青霉素誘導(dǎo)為L(zhǎng)型后，比較在不同培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況，選出最佳培養(yǎng)基。考慮到報(bào)告的各種培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分差別最大，首先利用拉丁方試驗(yàn)方法對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行優(yōu)選試驗(yàn)，在選出最佳營(yíng)養(yǎng)成分的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分、滲透壓、瓊脂濃度各因素之間交互影響的研究，運(yùn)用正交試驗(yàn)，選出最佳組合。
1材料
1.1菌種：由山東省防疫站購(gòu)得金黃色葡萄球菌(金)、甲型鏈球菌(甲)、傷寒桿菌(傷)、大腸桿菌(大)各5株。經(jīng)青霉素誘導(dǎo)為L(zhǎng)型[3-4]，菌落及細(xì)胞壁染色均典型后用于下一步試驗(yàn)。
1.2營(yíng)養(yǎng)成分：人血漿購(gòu)自德州血站，羊血漿、兔血漿由本實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)動(dòng)物直接采取，雞蛋購(gòu)自雞場(chǎng)三日內(nèi)鮮蛋。
1.3方法
1.3.1運(yùn)用拉丁方設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下
菌株： A(金)B(大)C(傷) D(甲)
成分： 羊血漿人血漿 卵黃鹽水兔血漿
濃度：5%10% 15%20%
按水平數(shù)選4×4 基本方，使用整行整列調(diào)換使之隨機(jī)化，并規(guī)定字母為菌株，行為濃度，列為營(yíng)養(yǎng)成分。
選基本方：
將四種細(xì)菌L型之典型菌落接種高滲肉湯培養(yǎng)6小時(shí)后，取0.1ml，涂布接種于各種培養(yǎng)基，放37℃大氣環(huán)境48小時(shí)，觀察記錄其L型菌落形成單位。每種培養(yǎng)基種5個(gè)平皿，計(jì)數(shù)菌落數(shù)后取平均值。
1.3.2運(yùn)用正交法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下
每種培養(yǎng)基種20個(gè)平皿，每種每株一個(gè)平皿，細(xì)菌接種方法及結(jié)果記錄同前。
2結(jié)果
2.1拉丁方試驗(yàn)結(jié)果以菌落形成單位表示。
統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果：
V1=3V2=12查F界值表P<0.01各處理間有明顯差異。
處理間樣本均數(shù)兩兩比較(q檢驗(yàn))
2.2正交試驗(yàn)結(jié)果選正交表如下：Le(3)4結(jié)果以菌落形成單位表示。
極差分析：
I429 446 440I+II+III=1481
II 650 605 525主要因素為A
III402 442 516最優(yōu)組合：
R 248 16385AII BII CII
3討論
研究結(jié)果表明，卵黃鹽水和人血漿是培養(yǎng)細(xì)菌L型的最佳營(yíng)養(yǎng)成分，兩者之間無明顯差異。卵黃營(yíng)養(yǎng)豐富，且不含抗體、補(bǔ)體、干擾素、淋巴因子等不利于細(xì)菌生長(zhǎng)的免疫活性成分;加之卵黃材料易得，價(jià)格便宜，易于保存，不易污染，不需滅活等優(yōu)點(diǎn)，因此，卵黃鹽水作為培養(yǎng)細(xì)菌L型的營(yíng)養(yǎng)成分，可推廣應(yīng)用。
經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理表明，其最優(yōu)組合為：10%卵黃鹽水、4%NaCl、0.8%瓊脂。
參考文獻(xiàn)
[1] 郭玉華.血液標(biāo)本L型細(xì)菌培養(yǎng).中國(guó)社區(qū)醫(yī)師，2009，9(22)
[2]李艷，蔣漢茂.溶血法培養(yǎng)在細(xì)菌L型檢出中的應(yīng)用.中國(guó)醫(yī)學(xué)研究雜志， 2006，6(3)277-278
[3]林特夫，黃谷良.細(xì)菌L型感染的意義和研究進(jìn)展(四)-細(xì)菌L型的檢驗(yàn)和鑒定.蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，33(2).
[4]倪語(yǔ)星，尚紅.臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)(M).第4版.北京：人民衛(wèi)生出版社2007，40-50.
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