細(xì)菌室應(yīng)注意的一些事項

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　　【摘要】 從檢驗人員培訓(xùn)、消毒、工作態(tài)度、質(zhì)量控制、檢驗方案設(shè)計、使用抗菌藥物、菌種保存及廢棄物管理等幾個方面總結(jié)分析了臨床微生物檢驗注意的一些事項。

　　【關(guān)鍵詞】 臨床微生物; 檢驗; 問題; 措施

　　隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)的迅速發(fā)展，超級細(xì)菌的出現(xiàn)，細(xì)菌工作已引起人們的高度關(guān)注。筆者結(jié)合本醫(yī)院的實際情況， 對微生物實驗室的一些注意事項總結(jié)如下。

　　1加強(qiáng)院內(nèi)感染知識培訓(xùn)和自我防護(hù)培訓(xùn)內(nèi)容應(yīng)為職業(yè)道德教育，醫(yī)院感染管理的法律法規(guī)，相關(guān)的規(guī)章制度和操作規(guī)程[1]。醫(yī)院內(nèi)部患者聚集，因而是病原體高度集中的場所，某些醫(yī)院感染病原菌在潮濕環(huán)境中存活較久，進(jìn)入易感患者體內(nèi)，導(dǎo)致醫(yī)院感染，故定期對醫(yī)院的科室和病房做微生物監(jiān)測，可以及時發(fā)現(xiàn)傳染源，并制定預(yù)防感染和控制感染的措施。如反饋實驗室資料：微生物檢驗室應(yīng)每天對臨床各種標(biāo)本進(jìn)行耐藥譜匯總，并定期報告醫(yī)院感染控制部門，控制部門提供信息給臨床，以便臨床醫(yī)師了解醫(yī)院的主要流行病原菌及耐藥譜，加強(qiáng)合理使用抗生素;定期總計細(xì)菌藥敏試驗。醫(yī)院內(nèi)的感染監(jiān)測與控制工作與微生物檢驗室的水平密切相關(guān)故微生物檢驗工作者的專業(yè)素養(yǎng)應(yīng)得到訓(xùn)練與提高。應(yīng)提高檢驗工作者的理論素養(yǎng)，并豐富感染性疾病診斷、治療方面的相關(guān)知識。應(yīng)調(diào)動檢驗工作者的積極主動性，在快速準(zhǔn)確做好病原菌診斷的基礎(chǔ)上，及時與臨床進(jìn)行有效溝通。檢驗工作者應(yīng)把醫(yī)院感染監(jiān)測工作當(dāng)成自己的責(zé)任和使命，指導(dǎo)臨床實施科學(xué)的消毒和隔離，真正發(fā)揮微生物檢驗工作者在醫(yī)院感染控制工作中的重要作用。操作時戴帽子、口罩, 必要時穿隔離衣、膠鞋、戴手套, 隨時注意手的清潔、消毒。其人員應(yīng)進(jìn)行定期健康體檢及必要的預(yù)防接種，增強(qiáng)自身抵抗力。

　　2做好消毒工作室內(nèi)定時通風(fēng)、紫外線照射, 物體表面用消毒液擦拭, 嚴(yán)格劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū), 增加設(shè)施投入, 房間布局合理, 防止危險因素擴(kuò)散, 每月進(jìn)行室內(nèi)微生物學(xué)檢測。紫外線消毒具有比較多的優(yōu)勢，張璐曾在研究中指出其優(yōu)點：(1) 高效率殺菌性能： 紫外線一般在使用1～2 s 后對細(xì)菌、病毒的殺菌即可達(dá)到99%~99.9%的殺菌率; (2) 高效的廣譜性， 紫外線殺菌具有最高的光譜性非選擇性的， 在進(jìn)行有效照射后， 它對幾乎所有的細(xì)菌、病毒等均達(dá)到高效率殺滅; (3) 無二次污染可能，在進(jìn)行紫外線消毒殺菌過程中， 不添加任何化學(xué)藥劑， 純物理消毒， 因此沒有對周圍環(huán)境產(chǎn)生二次污染的可能性; (4) 紫外線殺菌設(shè)備簡單， 占用空間小， 運行維護(hù)費用低， 因此總投資較少， 成本低[2]。

　　3檢驗人員的態(tài)度問題臨床微生物檢驗至今為止仍不能完全脫離手工，許多結(jié)果的判斷仍有賴于工作人員的主觀判斷。因此,檢驗人員的工作態(tài)度直接影響檢驗結(jié)果。臨床微生物檢驗涉及的環(huán)節(jié)較多,任何一個環(huán)節(jié)中細(xì)小的差錯,就有可能導(dǎo)致檢驗結(jié)果改變,甚至可能會誤導(dǎo)臨床治療。臨床微生物檢驗人員在日常工作中必須嚴(yán)格按照操作規(guī)范進(jìn)行操作,時刻將每一位患者的安危系于心,牢記自己的工作職責(zé)。

　　4質(zhì)量控制要到位質(zhì)量控制(室內(nèi)、室間)是實驗室的支柱，從時間段來看，包括分析前、中、后，工作中注意細(xì)節(jié)，就可以回顧性解決一些實際問題。堅持室內(nèi)質(zhì)量控制是做好室間質(zhì)量控制的前提, 室內(nèi)質(zhì)量控制項目應(yīng)包括標(biāo)本采集、培養(yǎng)基、試劑、判斷血清、藥敏紙片等。如：采集的標(biāo)本不合格， 這方面問題較多的是痰液和尿液標(biāo)本， 對于痰液標(biāo)本， 正確的留取方法是先讓患者用清水漱口3次， 然后囑其用力從氣管深部咳出痰液， 吐入無菌容器內(nèi)送檢。 而實際情況是很多醫(yī)院在采用自然咳痰法留取痰液標(biāo)本時， 臨床醫(yī)生和護(hù)士不做必要的指導(dǎo)， 直接讓患者留痰， 這樣得到的痰標(biāo)本常常造成氣管、 咽喉及口腔常居菌的嚴(yán)重污染， 有的可能根本沒有痰液成分， 這樣結(jié)果常導(dǎo)致致病菌和常居菌混淆， 造成誤檢誤報。 對于尿液標(biāo)本， 應(yīng)根據(jù)檢驗?zāi)康倪x擇不同的采集方法， 如疑為尿道炎或做衣原體培養(yǎng)檢查， 應(yīng)取前段尿3～4ml; 如懷疑為膀胱炎或腎炎， 多采用中段尿采集法; 為進(jìn)一步確定菌尿是否來自腎臟， 可用導(dǎo)尿管采集腎盂尿。如做厭氧培養(yǎng)， 需采用膀胱穿刺采集法。 而結(jié)核分枝桿菌的集菌檢查要留取24h尿液， 自然沉淀或加40%明礬形成沉淀后取沉淀送檢。標(biāo)本質(zhì)量的另一問題是采集時間， 常規(guī)要求應(yīng)在疾病的早期、 急性期、 癥狀典型時和用藥之前采集標(biāo)本， 對于已用藥的患者應(yīng)停藥3天后采集標(biāo)本; 不能停藥的， 應(yīng)在下次用藥之前采集，而且需將標(biāo)本接種在含有藥物中和劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。選擇購買理想的成品培養(yǎng)基，知名大公司的生化反應(yīng)管及進(jìn)口藥敏紙片;對于較難鑒定的菌種, 必要時對一些生化反應(yīng)多做幾次, 以達(dá)到正確鑒定的目的;參考資料非常重要,要求做到全新, 要經(jīng)常不斷地更新知識, 接受新信息, 從本質(zhì)上提高解決疑難問題的能力。而參加細(xì)菌學(xué)室間質(zhì)評活動, 則是對實驗室的工作水平作出的綜合判斷, 也是對實驗室內(nèi)質(zhì)量控制的檢驗, 對于提高細(xì)菌鑒定水平, 獲取有關(guān)微生物學(xué)的新資料、新方法、新信息、發(fā)現(xiàn)和分析細(xì)菌檢驗工作中的錯誤原因, 進(jìn)而可以提高細(xì)菌檢驗水平和工作質(zhì)量。

　　5檢驗方案的設(shè)計在臨床微生物檢驗中， 檢驗方案的設(shè)計是非常重要的， 它直接影響到檢出率的高低。 如結(jié)核桿菌形態(tài)學(xué)檢查中使用的染色法， 有人對比研究熒光染色法和萋-尼氏抗酸染色法， 結(jié)果熒光染色法檢出陽性率56.9%，萋-尼氏抗酸染色法檢出陽性率39.5%， 兩者差異有顯著性(P<0.01)。在培養(yǎng)檢查上， 培養(yǎng)基選擇和標(biāo)本的前處理對目的菌的檢出很重要。 對尿、 痰等臨床標(biāo)本進(jìn)行必要的前處理可除去污染的雜菌， 進(jìn)而明顯提高陽性檢出率，比如用生理鹽水清洗痰液。 在培養(yǎng)基的使用上， 常規(guī)培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基種類有限， 有些目的菌因成分的抑制而在所用的培養(yǎng)基中不生長。 比如， 對腹瀉患者取糞便分離培養(yǎng)時， 常規(guī)所用的是伊紅美蘭瓊脂和SS瓊脂平板。 腸桿菌科細(xì)菌能被選擇出來， 但弧菌科有些細(xì)菌 (如副溶血性弧菌) 因其嗜鹽性在這兩種培養(yǎng)基上多不生長。 如果對這類細(xì)菌仍用常規(guī)培養(yǎng)基分離培養(yǎng)， 其結(jié)果自然是造成漏檢。

　　6合理使用抗菌藥物 細(xì)菌室人員在藥敏試驗時, 對病原菌耐藥性變遷起到監(jiān)控作用, 通過對病原菌耐藥性的總結(jié)和分析, 可獲得病原菌耐藥性變化的資料, 并改變目前病原學(xué)診斷。細(xì)菌培養(yǎng)時間較長不能適應(yīng)臨床的現(xiàn)狀,應(yīng)盡快提高細(xì)菌快速診斷的水平。根據(jù)病原菌種類及細(xì)菌的藥敏試驗結(jié)果, 合理選用抗菌藥物, 給臨床提供指導(dǎo), 避免臨床盲目用藥, 控制耐藥菌株的產(chǎn)生, 減輕患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān), 防止醫(yī)院感染的發(fā)生。

　　7做好菌種保存與管理[3]收集、保存與管理菌種, 是微生物實驗室檢驗工作中一項重要內(nèi)容。尤其是計量認(rèn)證實施后, 實驗室的工作都要程序化、規(guī)范化, 對菌種的保存和管理也提出了更嚴(yán)格的要求, 收集、保存與管理好菌種, 對提高微生物檢驗工作的質(zhì)量至關(guān)重要。對一般細(xì)菌的保存, 如大腸桿菌、葡萄球菌、綠膿桿菌等直接接種普通瓊脂斜面, 35℃培養(yǎng)18～24h后, 放入4℃冰箱, 可保存1～2 個月。 對白色念珠菌的保存: 一般采用沙保羅氏瓊脂斜面, 28℃培養(yǎng)48～72h后, 放入4℃冰箱, 可保存2～3個月。對烈性細(xì)菌的保存: 如霍亂弧菌等, 應(yīng)該采取及時送上級單位, 若暫時未能上送的菌種應(yīng)有專人保管。保存菌種的安全問題, 應(yīng)專門制定一個菌種保管程序性文件, 明確職責(zé)，健全菌種檔案, 認(rèn)真作好登記, 統(tǒng)一編號, 按規(guī)定條件保存，以備用。實驗完畢后, 要及時銷毀菌株, 并做好記錄,嚴(yán)防病原菌外泄、污染。

　　8做好廢棄物管理一次性醫(yī)療用品、器具用后消毒、毀形、焚燒, 專人管理無害化處理, 并進(jìn)行登記。

　　【參考文獻(xiàn)】

　　1葉應(yīng)嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規(guī)程.南京: 東南大學(xué)出版社,1991: 399-400.

　　2張璐. 關(guān)于紫外線筷子消毒機(jī)消毒效果的評價. 山西醫(yī)藥雜志， 2009， 38 (9)： 820.

　　3陳秀英.菌種保存方法的比較.中國衛(wèi)生檢驗雜志, 2002,12(2):231.

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