- 相關(guān)推薦
均勻設(shè)計(jì)法篩選蟾酥貼劑的透皮吸收促進(jìn)劑論文
目的 篩選蟾酥貼劑的復(fù)合型透皮吸收促進(jìn)劑。方法 以裸鼠皮膚為實(shí)驗(yàn)屏障，應(yīng)用均勻設(shè)計(jì)法從氮酮、丙二醇、油酸中選擇蟾酥貼劑的最佳吸收促進(jìn)劑及其最佳配比。結(jié)果 氮酮、丙二醇、油酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)配比為6%∶10%∶0%時(shí)，蟾酥貼片中的蟾酥有最大的透皮速率常數(shù)。結(jié)論 氮酮丙二醇復(fù)合透皮吸收促進(jìn)劑可促進(jìn)蟾酥中蟾毒內(nèi)酯類成分的透皮吸收。Abstract:Objective To optimize the skin penetration enhancers of arenobufagin patch.Methods Uniform design was used to optimize the 3 factors in the patch, namely azone, propylene glycol and oleic acid.Results and Conclusion The transdermal absorption reached a maximum when the ratio of azone, propylene glycol and oleic acid was 6%∶10%∶0%.
Key words:Arenobufagin; uniform design; azone; propylene glycol; oleic acid
蟾蜍為蟾蜍科動(dòng)物中華大蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor 或黑眶蟾蜍 Bufo melanostictus Schneider 的干燥分泌物，具有解毒、止痛、開(kāi)竅醒神的功效，臨床用于治療癰疽疔瘡、咽喉腫痛、中暑神昏、腹痛吐瀉等。由于毒性較大，常外用于治療腫瘤、肩周炎等，因而有必要進(jìn)行其透皮給藥基礎(chǔ)研究。經(jīng)皮給藥系統(tǒng)（transdermal drug delivery systems, 簡(jiǎn)稱TDDs）或稱經(jīng)皮治療系統(tǒng)（trandermal thrapeutic systerms 簡(jiǎn)稱TTS）是藥物經(jīng)由皮膚吸收進(jìn)入人體血液循環(huán)并達(dá)到有效血藥濃度、實(shí)現(xiàn)疾病治療或預(yù)防的一類制劑。這類制劑在歐美國(guó)家習(xí)稱為貼劑（patch），在國(guó)內(nèi)多定名為貼片。由于皮膚是限制藥物吸收程度和速度的屏障，在經(jīng)皮給藥系統(tǒng)研究中，透皮吸收促進(jìn)劑的選擇是關(guān)鍵。本文以Franz擴(kuò)散池為實(shí)驗(yàn)工具，用均勻設(shè)計(jì)法篩選了蟾酥貼劑的復(fù)合透皮吸收促進(jìn)劑，旨在為蟾酥經(jīng)皮給藥系統(tǒng)的研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
1 實(shí)驗(yàn)材料
蟾酥（購(gòu)于南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院中藥房，經(jīng)南方醫(yī)科大學(xué)陳興興教授鑒定符合藥典標(biāo)準(zhǔn)）；脂蟾毒內(nèi)酯對(duì)照品(中國(guó)藥品與生物制品檢定所)。聚丙烯酸酯壓敏膠、硅橡膠壓敏膠、聚異丁烯壓敏膠（藥用，廣州市化學(xué)工業(yè)研究所），PVA1788（藥用，廣州南方化玻公司）。
貝克曼紫外分光光度計(jì)（美國(guó)貝克曼公司）；滲透擴(kuò)散裝置(中國(guó)藥科大學(xué)藥劑教研室提供)；SHZ?82型電熱恒溫水浴箱(江蘇太倉(cāng)醫(yī)療器械廠)；多功能磁力攪拌器(安徽省天長(zhǎng)恒運(yùn)電器廠)。
雄性健康2周齡Balb/c裸鼠，由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
2 方法與結(jié)果
2.1 皮膚滲透液中蟾毒內(nèi)酯分析方法的建立
2.1．1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備［1］
精密稱取脂蟾毒內(nèi)酯，加少量無(wú)水乙醇溶解后，定量轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，配制成質(zhì)量濃度為0.206 mg/mL蟾毒內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述蟾毒內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)液0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL各2份，一份置于10 mL容量瓶中，加乙醇?生理鹽水溶液（體積比50∶50）至刻度，另一份精密加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)4％氫氧化鈉水溶液2 mL，用乙醇稀釋成刻度，搖勻，室溫放置40 min后于360 nm處測(cè)定水解前后的吸光度，計(jì)算吸光度差值ΔA，以ΔA對(duì)蟾毒內(nèi)酯濃度進(jìn)行回歸。
2.1．2 干擾試驗(yàn)
按“2.2.3”項(xiàng)的透皮試驗(yàn)方法，取12 h時(shí)間點(diǎn)的透皮接收液適量，在200～390 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，研究透皮接收液中的其他成分是否會(huì)干擾蟾毒內(nèi)酯的含量測(cè)定。
2.2 透皮吸收試驗(yàn)
2.2.1 皮膚的處理
裸鼠（18～20 g）處死后直接取腹部皮膚，仔細(xì)剝離皮下脂肪層，置于生理鹽水中于-40 ℃冷凍保存，實(shí)驗(yàn)前自然解凍，于1周內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
2.2.2 透皮吸收擴(kuò)散裝置［2］
透皮吸收擴(kuò)散裝置由上下兩只筒狀玻璃管對(duì)合而成，夾于玻璃管間的皮膚將其分成上下兩室。上室為擴(kuò)散室，下室為接受室，在接受室的底部連有一個(gè)取樣管，供取樣、補(bǔ)充接收液和排除氣泡用，擴(kuò)散室和接受室直徑1.6 cm，滲透面積為2.01 cm2，實(shí)驗(yàn)中以潛水式多功能電磁攪拌器維持接受室動(dòng)態(tài)環(huán)境，實(shí)驗(yàn)維持32 ℃經(jīng)皮滲透條件。
2.2.3 透皮吸收試驗(yàn)方法
將所制備蟾酥貼片貼于預(yù)處理動(dòng)物皮膚，注意結(jié)合緊密勿有氣泡，然后固定在滲透擴(kuò)散裝置的擴(kuò)散室與接受室之間，貼片的背襯層面向擴(kuò)散室。在接受室中注入接收液17.0 mL，液面恰與皮膚內(nèi)層接觸，開(kāi)動(dòng)電磁攪拌器和恒溫水浴，保持恒速攪拌（約200 r/min）和恒溫，在設(shè)定時(shí)間取樣5.0 mL置具塞試管中，每次取樣后均補(bǔ)加相同體積的新鮮接收液并排除接受室中的氣泡，樣液經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾后，于360 nm處測(cè)定吸光度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線求出相應(yīng)的藥物濃度，按下式計(jì)算累積滲透量（Q）：
Q=Cn×17+∑n－1i=1Ci×5Aug
式中，Cn：第n個(gè)取樣點(diǎn)測(cè)得的藥物濃度（μg/mL），Ci：第i個(gè)取樣點(diǎn)測(cè)得的藥物濃度（μg/mL），A：滲透面積（cm2）。以累積滲透量Q對(duì)時(shí)間t1/2進(jìn)行線性回歸所得方程即為Higuchi方程，所得斜率(K)即為透皮速率常數(shù)（J，μg·h·cm-2）。
2.3 蟾酥貼片的制備
精密稱取處方量蟾酥及處方量的PVA、促滲劑，置適量體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇中，加熱回流使溶解，鋪膜、烘干，脫膜，用流延工藝涂布?jí)好裟z后，與背襯層和保護(hù)層復(fù)合即得成品。
2.4 透皮吸收促進(jìn)劑的篩選
采用均勻設(shè)計(jì)［3］，以丙二醇（X2）、油酸鈉（X3）、氮酮（X1）3種促進(jìn)劑的5種不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行試驗(yàn)，計(jì)算每次試驗(yàn)的透皮速率常數(shù)，水平安排見(jiàn)表1。每次試驗(yàn)的Higuchi方程和透皮速率常數(shù)見(jiàn)表2。表1 因素和水平（略）表2 Higuchi方程及透皮吸收速率常數(shù)（略）
用計(jì)算機(jī)將表中各因素的各水平對(duì)透皮速度率常數(shù)（J）進(jìn)行回歸，得多元回歸方程為
Y=186.30＋2.68X1＋4.91X2－3.02X3
R=0.9943,F=29.46,S=4.40
根據(jù)回歸方程，計(jì)算優(yōu)化條件為：
X1=6%，X2=10%，X3=0%
按優(yōu)化條件，計(jì)算Y值，得Y=198.64。
對(duì)優(yōu)化條件進(jìn)行驗(yàn)證，按優(yōu)化條件制備3批PVA膜，按前法測(cè)定速率常數(shù)J，得平均速率常數(shù)為189.60 μg·h·cm-2。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與預(yù)測(cè)結(jié)果基本一致。
3 討 論
3．1 目前研究認(rèn)為，透皮吸收促進(jìn)劑的復(fù)合應(yīng)用較單一應(yīng)用對(duì)藥物的透皮吸收效果更佳。氮酮是第一個(gè)專門(mén)作為皮膚滲透促進(jìn)劑而研制開(kāi)發(fā)的化合物，用量少，對(duì)皮膚的毒性、刺激性都很低，是目前公認(rèn)的一種優(yōu)良的滲透促進(jìn)劑，常與極性溶劑丙二醇（PG）并用，產(chǎn)生協(xié)同作用。油酸的促滲機(jī)制是滲入角質(zhì)層細(xì)胞間脂質(zhì)中，影響脂質(zhì)雙分子層排列的密實(shí)性和流動(dòng)性。丙二醇在透皮制劑中經(jīng)常用作溶媒或載體，對(duì)藥物和其他促滲劑起到溶解和均勻混合作用。丙二醇單獨(dú)作為促滲劑時(shí)可能滲入角質(zhì)層并在其中形成積蓄，由此增加藥物在角質(zhì)層中的溶解性和分配性質(zhì)。本研究結(jié)果表明，當(dāng)?shù)?丙二醇的質(zhì)量比為6∶10時(shí)，蟾酥貼片中蟾毒內(nèi)酯類成分的滲透速率常數(shù)有最大值，提示丙二醇可能促進(jìn)藥物滲入角質(zhì)層從而促進(jìn)氮酮的滲透作用。
3.2 均勻設(shè)計(jì)是近年來(lái)解決多因素多水平問(wèn)題較好的方法，是對(duì)正交設(shè)計(jì)的簡(jiǎn)化和發(fā)展，其實(shí)驗(yàn)點(diǎn)在考察范圍內(nèi)“均勻分散”，有效減少實(shí)驗(yàn)次數(shù)，節(jié)約了時(shí)間和費(fèi)用，同時(shí)又能獲得對(duì)實(shí)驗(yàn)對(duì)象較全面深入的認(rèn)識(shí)。本文通過(guò)均勻設(shè)計(jì)法篩選了蟾酥的透皮吸收促進(jìn)劑，方案較正交設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單。本文結(jié)果為蟾酥經(jīng)皮給藥系統(tǒng)的開(kāi)發(fā)研究提供了初步理論基礎(chǔ)。
【均勻設(shè)計(jì)法篩選蟾酥貼劑的透皮吸收促進(jìn)劑論文】相關(guān)文章：
芬太尼透皮貼劑對(duì)晚期癌癥患者痛覺(jué)及生活質(zhì)量的影響10-05
村中醫(yī)圖書(shū)室是中醫(yī)發(fā)展農(nóng)民健康的促進(jìn)劑10-07
涂膜附著機(jī)理與附著力促進(jìn)劑的選擇10-05
在食品添加劑檢驗(yàn)中的高效液相色譜法的運(yùn)用分析論文10-09
食品添加劑研究論文10-09
食品添加劑作用論文11-15
精選關(guān)于對(duì)聯(lián)的正確貼法01-25
青霉素皮試論文10-09