醫(yī)學(xué)研究生開(kāi)設(shè)流式細(xì)胞檢測(cè)術(shù)課程的初步探討論文

　　【關(guān)鍵詞】 醫(yī)學(xué)研究生；流式細(xì)胞術(shù)；課程

　　流式細(xì)胞術(shù)（flow cytometry FCM）作為一門(mén)生物監(jiān)測(cè)技術(shù)已得到廣泛應(yīng)用，涉及細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、腫瘤學(xué)、血液學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)等方面［1］，具有檢測(cè)速度快、測(cè)量指標(biāo)多、采集數(shù)據(jù)量大、分析全面、精度高、方法靈活等特點(diǎn)。流式細(xì)胞作為一項(xiàng)重要技術(shù)也成為研究生學(xué)習(xí)的重要內(nèi)容，但目前在醫(yī)學(xué)研究生教學(xué)中開(kāi)展流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)課程的院校很少。本文就醫(yī)學(xué)研究生開(kāi)設(shè)流式細(xì)胞檢測(cè)術(shù)課程的初步探討。

　　1流式細(xì)胞術(shù)在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用

　　流式細(xì)胞儀的工作原理是將待測(cè)細(xì)胞經(jīng)特異性熒光染料染色后放入樣品管中，在氣體的壓力下進(jìn)入充滿鞘液的流動(dòng)室。在鞘液的約束下細(xì)胞排成單列由流動(dòng)室的噴嘴噴出，形成細(xì)胞柱，后者與入射的激光束垂直相交，液柱中的細(xì)胞被激光激發(fā)產(chǎn)生熒光。儀器中一系列光學(xué)系統(tǒng)（透鏡、光闌、濾片和檢測(cè)器等）收集熒光、光散射、光吸收或細(xì)胞電阻抗等信號(hào)，計(jì)算機(jī)系統(tǒng)進(jìn)行收集、儲(chǔ)存、顯示并分析被測(cè)定的各種信號(hào)，對(duì)各種指標(biāo)做出統(tǒng)計(jì)分析［2］。流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)目前已成為研究生在完成科學(xué)研究中廣泛采用的研究手段。主要應(yīng)用有：①染色體核型分析；②檢測(cè)特異基因編碼的細(xì)胞分子；③家畜性別預(yù)選擇；④快速微生物鑒定等。

　　2流式細(xì)胞術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用

　　2.1在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用

　　FCM在腫瘤學(xué)中應(yīng)用最早。首先需要把實(shí)體瘤組織解聚、分散制備成單細(xì)胞懸液，用熒光染料（碘化吡啶PI）染色后對(duì)細(xì)胞的DNA含量進(jìn)行分析，將不易區(qū)分的群體細(xì)胞分成三個(gè)亞群（G1期，S期和G2期），DNA含量直接代表細(xì)胞的倍體狀態(tài)、非倍體細(xì)胞與腫瘤惡性程度有關(guān)。臨床醫(yī)師可以根據(jù)細(xì)胞周期各時(shí)相的分布情況，設(shè)計(jì)最佳的治療方案，及時(shí)選用有效的藥物，對(duì)瘤細(xì)胞達(dá)到最大的殺傷效果［23］。

　　2.2在臨床細(xì)胞免疫中的作用

　　FCM通過(guò)熒光抗原抗體檢測(cè)技術(shù)對(duì)細(xì)胞表面抗原分析，進(jìn)行細(xì)胞分類和亞群分析。這一技術(shù)對(duì)于人體細(xì)胞免疫功能的評(píng)估以及各種血液病及腫瘤的診斷和治療有重要作用。

　　2.3在血液病診斷和治療中的應(yīng)用

　　FCM通過(guò)對(duì)外周血細(xì)胞或骨髓細(xì)胞表面抗原和DNA的檢測(cè)分析，對(duì)各種血液病的診斷、預(yù)后判斷和治療起著舉足輕重的作用。主要有：①白血病的診斷和治療；②其它種類血液病的診斷和治療監(jiān)測(cè)；③網(wǎng)織紅細(xì)胞的測(cè)定及臨床應(yīng)用。

　　2.4在血栓與出血性疾病中的應(yīng)用

　　正常情況下血小板以分散狀態(tài)在血管內(nèi)運(yùn)行，但當(dāng)血管損傷、血流改變或受到化學(xué)物質(zhì)刺激時(shí)血小板被活化而發(fā)生一系列改變。由于血小板的活化程度可由血小板膜糖蛋白表達(dá)水平的高低來(lái)判斷，F(xiàn)CM測(cè)定血小板膜糖蛋白的表達(dá)情況成為檢查血小板功能的一種新手段。

　　除上述臨床應(yīng)用外，流式細(xì)胞還逐漸成為一種常規(guī)的檢驗(yàn)手段。為了得到準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)分析結(jié)果，目前有多個(gè)廠家將FCM技術(shù)應(yīng)用到血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀上進(jìn)行白細(xì)胞五項(xiàng)分類計(jì)數(shù)和網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)與分析。這種方法速度快、結(jié)果準(zhǔn)確可靠。另外，流式細(xì)胞在體液檢查也具有重要的作用［1］。

　　3開(kāi)設(shè)流式細(xì)胞檢測(cè)術(shù)課程的意義

　　醫(yī)學(xué)研究生的培養(yǎng)，不僅要使其掌握醫(yī)學(xué)基本知識(shí)與臨床技能，更重要的是讓其具備跟蹤醫(yī)學(xué)進(jìn)展的能力，進(jìn)而自我完善、不斷創(chuàng)新。流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)已滲入科研及臨床工作的各個(gè)方面，貫穿于基礎(chǔ)研究及臨床檢驗(yàn)等。但目前的研究生教育中，還沒(méi)有系統(tǒng)的開(kāi)展流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)的課程。研究生在科研及臨床檢驗(yàn)中對(duì)流式細(xì)胞術(shù)的檢測(cè)原理、臨床應(yīng)用、數(shù)據(jù)分析與處理等并不清楚，這樣就限制類流式細(xì)胞術(shù)在科研及臨床工作中的應(yīng)用及普及，對(duì)提高臨床檢測(cè)及診斷水平非常不利。研究生在學(xué)習(xí)中可以將流式細(xì)胞技術(shù)視為一種媒介手段，通過(guò)對(duì)該技術(shù)的學(xué)習(xí)，可以了解涵蓋醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的全部?jī)?nèi)容，掌握醫(yī)學(xué)最新的知識(shí)內(nèi)容和發(fā)展動(dòng)態(tài)；可以掌握科研方法和程序，通過(guò)動(dòng)手實(shí)踐培養(yǎng)實(shí)事求是的科研態(tài)度以及善于發(fā)現(xiàn)問(wèn)題和提出創(chuàng)新性課題的能力［3］，對(duì)培養(yǎng)適應(yīng)21世紀(jì)要求的復(fù)合型科研及臨床工作人員具有重要意義。

　　【參考文獻(xiàn)】

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　　［3］ 郭光金，余匯洋，蔣登金，等.碩士研究生顯微外科技術(shù)課程設(shè)置及教學(xué)體會(huì)［J］.局解手術(shù)學(xué)雜志，2003,12(1):64-65.

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