水環(huán)境糞大腸菌群監(jiān)測(cè)2種分析方法的對(duì)比論文

時(shí)間：2022-10-09 08:50:11 論文范文我要投稿

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　　糞大腸菌群是監(jiān)測(cè)水體是否被糞便污染的指示菌，是監(jiān)測(cè)地表水尤其是飲用地表水的重要指標(biāo)之一。它是總大腸菌群的一部分，其基本性狀和總大腸菌群相似。在實(shí)驗(yàn)時(shí)，將培養(yǎng)溫度提高到44.5°C，我們把可以在此條件下生長(zhǎng)并發(fā)酵產(chǎn)酸產(chǎn)氣的，稱(chēng)糞大腸菌群。

水環(huán)境糞大腸菌群監(jiān)測(cè)2種分析方法的對(duì)比論文

　　經(jīng)典的糞大腸菌群的監(jiān)測(cè)方法是采用多管發(fā)酵法，但這種方法具有前期準(zhǔn)備時(shí)間長(zhǎng)、任務(wù)繁重;培養(yǎng)過(guò)程中操作繁瑣的缺點(diǎn)，并且事后還要清洗大量的試管，浪費(fèi)人力、物力、財(cái)力。為此很多廠(chǎng)家研發(fā)了大腸菌群的快檢紙片。采用紙片法，大大縮短了實(shí)驗(yàn)的時(shí)間，并且根本不需要再清理大量的試管，減輕了勞動(dòng)強(qiáng)度，也節(jié)約了寶貴的水資源。那么，多管發(fā)酵法和紙片法的數(shù)據(jù)究竟有沒(méi)有相關(guān)性?作者采用某廠(chǎng)生產(chǎn)的大腸菌群的快檢紙片通過(guò)對(duì)比實(shí)驗(yàn)旨在探討這個(gè)問(wèn)題。

　　一、分析方法

　　1、多管發(fā)酵法

　　(1)培養(yǎng)基

　　單倍和三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(培養(yǎng)液的成分與制備略，下同)

　　EC培養(yǎng)液

　　(2)步驟

　�、偎畼咏臃N量：將水樣充分混勻后，根據(jù)水樣污染的程度確定水樣的接種量，每個(gè)樣品至少用3個(gè)不同的水樣量接種，同一接種水樣量要有五管。

　　如果接種的體積為10ml，則接種于含有三倍濃度5ml的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的試管內(nèi)，如果接種量為1ml或者小于1ml，則接種于含有單倍濃度10ml的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的試管內(nèi)。

　�、诔醢l(fā)酵：

　　將接種了水樣的試管，在37±0.5°C下培養(yǎng)24±2h，產(chǎn)酸和產(chǎn)氣的發(fā)酵管表明實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性。如產(chǎn)氣不明顯，可輕拍試管，有小氣泡升起的為陽(yáng)性。

　�、蹚�(fù)發(fā)酵試驗(yàn)

　　輕微振蕩初發(fā)酵陽(yáng)性的發(fā)酵管，用3mm接種環(huán)將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到EC培養(yǎng)液中。在44±0.5°C水浴中培養(yǎng)24±2h，培養(yǎng)后立即觀察。發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣表明確信試驗(yàn)陽(yáng)性。

　　④計(jì)算和報(bào)告結(jié)果

　　根據(jù)不同接種量的發(fā)酵管所出現(xiàn)的陽(yáng)性結(jié)果的數(shù)目，從MPN表中查相應(yīng)的MPN指數(shù)，計(jì)算出每升水中糞大腸菌群的MPN值。

　　2、紙片法

　　采用某廠(chǎng)生產(chǎn)的大腸菌群快檢紙片

　�、偎畼咏臃N量：將水樣充分混勻后，根據(jù)水樣污染的程度確定水樣的稀釋倍數(shù)，每個(gè)樣品至少用3個(gè)不同的水樣量接種，同一接種水樣量要有五個(gè)紙片。

　　如果接種的體積為10ml，則接種于大紙片內(nèi)。如果接種量為1ml或者小于1ml，則接種小紙片內(nèi)。

　�、诎l(fā)酵試驗(yàn)

　　樣品接種后在44±0.5°C的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10-16小時(shí)后，觀察結(jié)果。

　�、塾�(jì)算和報(bào)告結(jié)果

　　紙片說(shuō)出現(xiàn)紅點(diǎn)，其周?chē)庶S色者為陽(yáng)性。根據(jù)不同接種量的紙片所出現(xiàn)的陽(yáng)性結(jié)果的數(shù)目，從MPN表中查相應(yīng)的MPN指數(shù)，計(jì)算出每升水中糞大腸菌群的MPN值。

　　二、t檢驗(yàn)的結(jié)果

　　根據(jù)成對(duì)樣本的假設(shè)檢驗(yàn)，對(duì)這2組數(shù)據(jù)進(jìn)行成對(duì)數(shù)據(jù)平均數(shù)的比較，看它們有無(wú)顯著性差異。