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醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)畢業(yè)論文

醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)論文選題

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  1.1性狀鑒別

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  蛇膽的性狀鑒別是根據(jù)膽囊的外形特征、色澤、大小、質(zhì)地、膽蒂位置、膽管(形狀、長度及韌性)、膽汁稠度、氣味等進(jìn)行比較的鑒別方法。蔣碧英[5]描述了正品蛇膽的性狀鑒別要點(diǎn);張穗[3]對(duì)14種蛇膽及其常見偽劣品進(jìn)行了外觀性狀鑒別。這種傳統(tǒng)手段簡單方便,可直觀地將蛇膽與一般偽品區(qū)別開來,在早期藥材收購、加工部門的現(xiàn)場鑒定中較常使用;但由于蛇膽的形態(tài)學(xué)特征往往因加工方法和條件不同而變化,鑒別效果因人不同(經(jīng)驗(yàn)、主觀影響等),因蛇而異(蛇的種類、大小、生理狀態(tài)等),因觀察環(huán)境(季節(jié)、光線等)而變化,誤差較大,現(xiàn)階段僅作為真?zhèn)舞b別的參考指標(biāo)。

  1.2顯微鑒別

  根據(jù)蛇膽的組織殘片、細(xì)胞或內(nèi)含物等特征進(jìn)行顯微鑒別是蛇膽原藥材鑒別的方法之一。楊育民等[6]依據(jù)蛇膽內(nèi)含物的形狀、大小及顏色等顯微特征鑒別了蛇膽及其偽充品鑒別;陸惠文[7]根據(jù)蛇膽與偽品等各自的組織學(xué)特點(diǎn)將待檢膽囊標(biāo)本制成石蠟切片,經(jīng)HE染色和顯微觀察,鑒別了蛇膽(眼鏡蛇、金環(huán)蛇、灰鼠蛇等)與偽品蛇膽(雞膽、青魚膽等)。該法雖鑒別效果較好且簡便,但僅適用于仍保留有顯微特征的原料藥材和成藥。由于膽的內(nèi)含物隨著蛇的生理狀態(tài)不同而有差異,組織學(xué)特征也因切片的取材位置不同而不同,因此增加了鑒別的難度;此外,目前大多數(shù)含蛇膽成藥不保留蛇膽的顯微特征,故此法不宜推廣。

  1.4分子生物學(xué)鑒定

  由于蛇膽保存和制劑加工過程中的處理方法往往破壞了蛇膽的完整性,因此依據(jù)性狀、顯微特征及理化性質(zhì)進(jìn)行鑒別有一定困難,分子生物學(xué)方法能克服上述問題,呈現(xiàn)更客觀的結(jié)果。眾所周知,物種的多樣性是基因多態(tài)性的結(jié)果,而基因多態(tài)性可在分子水平上檢測(cè),它比在形態(tài)、組織和化學(xué)水平上檢測(cè)更能代表其變異類型的遺傳標(biāo)記。王義權(quán)等[21]將分子標(biāo)記技術(shù)運(yùn)用到蛇類藥材的鑒定研究中,對(duì)游蛇科10種蛇基因組DNA的多態(tài)性進(jìn)行了分子遺傳標(biāo)記的研究;通過提取金錢白花蛇及其偽品藥材和原動(dòng)物樣品的模板DNA,分析其Cytb基因片斷鑒別了金錢白花蛇[22];

  沈曦等[23]通過比較12SrRNA和Cytb基因的部分序列鑒別了幾種蝮屬蛇類;劉向華等[24]從藥材蛇膽的膽衣和膽汁、原動(dòng)物棕黑錦蛇的肌肉和膽汁中提取DNA,經(jīng)PCR擴(kuò)增12SrRNA基因片段,鑒別了蛇類藥材。分子生物學(xué)鑒別方法雖能有效鑒別出蛇類藥材的種屬來源,目前在蛇類藥材的鑒別中應(yīng)用較廣,但由于市售蛇膽樣品的復(fù)雜性,蛇膽DNA的含量較低,故此法在蛇膽鑒別中的應(yīng)用較少,具體應(yīng)用方案還有待于進(jìn)一步完善。


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