微生物檢驗實習心得體會

　　當我們對人生或者事物有了新的思考時，寫心得體會是一個不錯的選擇，這樣就可以總結(jié)出具體的經(jīng)驗和想法。那么問題來了，應(yīng)該如何寫心得體會呢？下面是小編為大家整理的微生物檢驗實習心得體會，希望對大家有所幫助。

　　大三下學期5月份，我們動物檢疫專業(yè)的同學開始了為期2個多月的教學實習，在眾多輔導老師之中，我有幸跟隨我校動物科技學院預(yù)防系的趙宇軍教授進行學習。實習的地點就在我校動科樓的微生物實驗室，以前我們曾在這里上過實驗課，所以并不陌生。這次大家來到實驗室為自行選擇課題進行相關(guān)實驗操作，我對世界聞名的金黃色葡萄球菌非常感興趣，在老師的帶領(lǐng)下進行了相關(guān)食物中該菌的檢驗。下面我們來回顧這次實驗。

　　一、實驗內(nèi)容：食品中金黃葡萄球菌的檢測方法

　　實驗內(nèi)容

　　金黃色葡萄球菌是一種引起人類和動物化膿感染的重要致病菌，也是造成人類食物中毒的常見致病菌之一。本菌廣泛分布于自然界，如空氣、土壤、水及其它環(huán)境中。在人類和動物的皮膚及外界相通的腔道中，也經(jīng)常有本菌存在。據(jù)報導，在正常人群中的帶菌率可達30%~80%，其中皮膚帶菌率為8~22%，鼻腔和咽喉部等上呼吸道的帶菌率在40~50%以上，因此其可通過各種途徑和方式，尤其是經(jīng)工作人員的手和上呼吸道而污染食品。由于致病金黃葡萄球菌能產(chǎn)生腸毒素，故一旦細菌污染食品，并在合適的溫度環(huán)境下，細菌可以大量繁殖并產(chǎn)生腸毒素，從而引起消費者食物中毒。由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒，在世界各國都極為普遍。特別是在北美及歐洲等地區(qū)發(fā)病率更高。在上述這些國家中，每年有金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例，僅次于沙門氏菌，而在細菌性食物中毒病例排到第2~3位，有此而造成的經(jīng)濟損失也相當慘重，在我國由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例也時有報導，所以.

　　目前世界各國都把金黃色葡萄球菌列為食品衛(wèi)生的法定檢測項目。我國對金黃色葡萄球菌目前采用的方法是以國家標準GB.4789-10-84及檢驗檢疫系統(tǒng)行業(yè)標準SN.0172-92作為依據(jù)。

　　整個檢測過程獲得最終結(jié)果須時5天左右，既費時又費力，并造成貨物積壓，也影響貨物的及時出運，并使貨主的倉儲成本提高，造成較大的經(jīng)濟損失。多年來很多食品微生物實驗室都在探索和尋找一些準確性高，并快速的檢測方法，最近我們分別從美國3M公司和法國生物梅里埃公司獲得兩種快速檢測致病性金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基，其名稱為：①PetrifilmRS

　　A.CountPlate(由美國3M公司研制生產(chǎn))，是一種薄膜型快速檢測金黃色葡萄球菌的計數(shù)平板。②Baird-parker+RPFAgar.(由法國生物梅里埃公司研制生產(chǎn)的用Baird-Parker瓊脂加免血漿纖維蛋白原的金黃色葡萄球菌檢測計數(shù)平板)。

　　二、實驗原理：實驗原理：原理Petrifilm.RS

　　A.測試薄膜是由二部分組成。第一部分是由黃金色葡萄球菌培養(yǎng)基片，此培養(yǎng)基中含有經(jīng)修正的Barid-Parker，營養(yǎng)成分加上以冷水可溶解的膠質(zhì)。第二部分是一種耐熱核酸酶(TNase)反應(yīng)片，含有DNA及甲苯胺蘭(ToluidineBlue-O)及四唑指示劑(Tetraeolium)。此指示劑有助于菌落的計數(shù)及確定葡萄球菌耐熱核酸酶的存在。耐熱去氧核糖核酸(deoxyribonulcasDnase)為產(chǎn)毒金葡菌之典型特征，此酶非常耐熱，在100℃加熱30min，不易喪失活性，在130℃之下，其D值為16.6min，此酶之分子量為16800，等電點PH為9.6,耐熱去氧核糖酸與檢測血漿凝固酶相似，是一種鑒定金黃色葡萄球菌的方法，在Petrifilm.RSA檢測片上，耐熱DNA酶反應(yīng)看起來，呈粉紅色環(huán)帶包圍著一個紅色或蘭色的菌落。Petrifilm.RSA檢測片，必須與Peyrifilm耐熱核酸酶反應(yīng)片一起使用，單獨使用

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　　A.測試薄膜是由二部分組成。第一部分是由黃金色葡萄球菌培養(yǎng)基片，此培養(yǎng)基中含有經(jīng)修正的Barid-Parker，營養(yǎng)成分加上以冷水可溶解的膠質(zhì)。第二部分是一種耐熱核酸酶(TNase)反應(yīng)片，含有DNA及甲苯胺蘭(ToluidineBlue-O)及四唑指示劑(Tetraeolium)。此指示劑有助于菌落的計數(shù)及確定葡萄球菌耐熱核酸酶的存在。耐熱去氧核糖核酸(deoxyribonulcasDnase)為產(chǎn)毒金葡菌之典型特征，此酶非常耐熱，在100℃加熱30min，不易喪失活性，在130℃之下，其D值為16.6min，此酶之分子量為16800，等電點PH為9.6,耐熱去氧核糖酸與檢測血漿凝固酶相似，是一種鑒定金黃色葡萄球菌的方法，在Petrifilm.RSA檢測片上，耐熱DNA酶反應(yīng)看起來，呈粉紅色環(huán)帶包圍著一個紅色或蘭色的菌落。Petrifilm.RSA檢測片，必須與Peyrifilm耐熱核酸酶反應(yīng)片一起使用，單獨使用將不會顯示菌落，因為具有輔助計數(shù)菌落的指示劑是在反應(yīng)片上，而不是在Petrifilm.RSA檢測片上。Baird-parker+RPFagar，這一培養(yǎng)基中含有豐富的營養(yǎng)成分，其中以氯化鋰代替亞碲酸鉀，使菌落顏色呈黑色，RPF補充有兔血漿和牛纖維蛋白原，以便檢測凝固酶活力，胰酶可以抑制全部或部分圍繞凝固酶陽性菌落周圍沉淀暈環(huán)纖維蛋白的溶解，因此凡存在血漿凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌，將在培養(yǎng)基中呈現(xiàn)有暈環(huán)的黑色菌落，即可確認，并作計數(shù)。

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