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細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告
在生活中，大家逐漸認(rèn)識(shí)到報(bào)告的重要性，報(bào)告具有成文事后性的特點(diǎn)。寫(xiě)起報(bào)告來(lái)就毫無(wú)頭緒？下面是小編整理的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告，供大家參考借鑒，希望可以幫助到有需要的朋友。
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 1
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
了解細(xì)胞膜的滲透性及各類(lèi)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度
二、實(shí)驗(yàn)原理
1、在等滲溶液中，細(xì)胞對(duì)各種溶質(zhì)的透過(guò)性不同。有的溶質(zhì)可以進(jìn)入，有的溶質(zhì)不能滲入。
2、滲入的溶質(zhì)能提高細(xì)胞的滲透壓，促進(jìn)水分子進(jìn)入細(xì)胞，引起溶血現(xiàn)象。
3、不同的溶質(zhì)滲入到細(xì)胞內(nèi)的速度不同，因此溶血時(shí)間也不同。
三、實(shí)驗(yàn)材料
新鮮血液（雞血、豬血、牛血等）
四、實(shí)驗(yàn)器材
試管（1.5cmX18cm）、試管架、10ml移液管、1ml移液管、200ml燒杯（2個(gè)）、250ml容量瓶、移液槍、膠頭滴管、菜刀、吸球、電子天平、顯微鏡、蓋玻片、載玻片、秒表
五、實(shí)驗(yàn)藥品及試劑
0.17MNaCl、0.17MNH4Cl、0.17MNH4Ac、0.17MNaNO3、0.12MNa2SO4、0.12M草酸銨、0.32M葡萄糖、0.32M甘油、0.32M乙醇、0.32M丙酮、肝素抗凝劑
六、實(shí)驗(yàn)步驟
1、制備血液稀釋液
�。�1）抗凝劑的制備：首先稱(chēng)取1克肝素鈉粉末，然后加入0.17MNaCl溶液10ml（1∶10的比例），混合均勻，制成肝素抗凝劑。
�。�2）血液稀釋液的制備：取新鮮血液，按比例（肝素抗凝劑:血液=1∶10）混合均勻，配制成經(jīng)肝素抗凝的血液。
�。�3）按比例（經(jīng)肝素抗凝的血液∶0.17MNaCl溶液=1∶10）混合均勻，形成一種不透明的紅色液體。
2、低滲溶液（空白對(duì)照）的觀察
取試管一只，加入10ml蒸餾水，然后再加入1ml稀釋的血液。注意觀察溶液顏色的變化。結(jié)果是溶液由不透明的紅色變?yōu)槌吻�。記錄下這個(gè)過(guò)程所要的時(shí)間。
3、紅血球的滲透性
按表一的配制，分別在下列十種等滲溶液中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。輕輕搖動(dòng)，注意有無(wú)顏色變化，是否有溶血現(xiàn)象發(fā)生，記下時(shí)間（自加入稀釋血液到溶液逐漸由紅色變?yōu)橥该鞒吻�，紅血球全部溶血所需時(shí)間），填入表一的空格中。
4、顯微觀察
何為細(xì)胞膜？注意：這一步，動(dòng)作要非常迅速，否則雞血會(huì)凝固。或者先把抗凝劑加入到燒杯中，再加入新鮮的雞血，邊加邊震蕩即可。為何不同物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度不同？為什么新鮮的雞血會(huì)凝固？何為溶血現(xiàn)象？為什么這一步要使用0.17M的NaCl溶液？你知道有哪些血液抗凝劑？
�。�1）血液紅細(xì)胞的'觀察
滴一滴稀釋的血液于載玻片上，蓋上蓋玻片。用光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞的種類(lèi)、形狀和顏色。
�。�2）細(xì)胞破碎的觀察
在上一步的載玻片的一端滴加清水，在另一端吸水，并在顯微鏡下觀察細(xì)胞的破裂。
七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
1、比較和分析你所觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并解釋原因。
結(jié)果：
（1）在所提供的試劑中不溶血的有：
�。�2）在所提供的試劑中不完全溶血的有：
�。�3）在所提供的試劑中完全溶血的有：
結(jié)果分析與比較：結(jié)論：
2、繪制你所觀察到的血液細(xì)胞圖。
3、討論溶血實(shí)驗(yàn)在研究中應(yīng)用的可能性。
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 2
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、掌握顯示細(xì)胞中過(guò)氧化物酶反應(yīng)的原理和方法。
2、了解細(xì)胞凋亡的生物學(xué)意義
3、掌握凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)檢測(cè)方法
二、實(shí)驗(yàn)原理：
1、細(xì)胞內(nèi)的過(guò)氧化物酶能把許多胺類(lèi)氧化為有色化合物，用聯(lián)苯胺處理標(biāo)本，細(xì)胞內(nèi)的過(guò)氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色的聯(lián)苯胺藍(lán)，進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物，因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來(lái)判定過(guò)氧化物酶的有無(wú)或多少。中間產(chǎn)物藍(lán)色聯(lián)苯胺是不穩(wěn)定的，無(wú)需酶的參加即可氧化為棕色化合物。
2、細(xì)胞凋亡是指細(xì)胞在生理或病理?xiàng)l件下，遵循自身的程序，自己結(jié)束其生命的過(guò)程。它是一個(gè)主動(dòng)的、高度有序的，基因控制的，一系列酶參與的過(guò)程。
3、凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周?chē)?邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體;根據(jù)細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行顯微觀察是檢測(cè)細(xì)胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。
三、實(shí)驗(yàn)步驟：
細(xì)胞中過(guò)氧化物酶的顯示
1、在載片上滴一滴PBS緩沖液；
2、取骨髓細(xì)胞：用斷頸法處死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剝出后肢股骨，剪開(kāi)股骨一端，用牙簽尖的`一端插入剪開(kāi)的小孔中，摳取少許骨髓細(xì)胞置滴有PBS的載片上；
3、涂片：用另一玻片將骨髓細(xì)胞沿一個(gè)方向涂布推開(kāi)，室溫晾干；
4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸銅液，以蓋滿涂片為宜，處理30秒-1分鐘。
5、傾去硫酸銅液，直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應(yīng)6分鐘（以蓋滿涂片為宜）
6、清水沖洗，番紅復(fù)染2min。
7、鏡檢：清水沖洗，室溫晾干，先低倍鏡下觀察，后換高倍鏡下觀察（油鏡100x）
細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測(cè)與觀察吉姆薩染色:
1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)
2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞
3、95%乙醇固定5min
4、PBS緩沖液洗2次
5、吉姆薩染色液染色5min
6、蒸餾水輕輕洗去染液
7、普通光學(xué)顯微鏡下觀察。
吖啶橙染色:
1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)
2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞
3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min
4、PBS緩沖液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
6、選用藍(lán)光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀察。
四、結(jié)果與分析：
根據(jù)隨機(jī)選擇的幾個(gè)視野的統(tǒng)計(jì)，該樣品的細(xì)胞凋亡率=227/506x100=44.9
Hela細(xì)胞凋亡過(guò)程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化（吖啶橙染色）
五、思考題：
1、細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制
細(xì)胞凋亡是一個(gè)受基因調(diào)控、眾多細(xì)胞膜受體和胞漿蛋白參與的細(xì)胞主動(dòng)自殺過(guò)程，其觸發(fā)因素多種多樣，包括細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)因子和抑制因子對(duì)細(xì)胞凋亡的調(diào)控。
2、細(xì)胞凋亡的特征
凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周?chē)?邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體。
3、研究細(xì)胞凋亡的方法
定性的研究方法：常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場(chǎng)倒轉(zhuǎn)瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀察（普通光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡）
定量或半定量的研究方法：各種流式細(xì)胞儀方法、原位末端標(biāo)記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 3
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、通過(guò)對(duì)原核和真核各種形態(tài)細(xì)胞的光學(xué)顯微鏡觀察，了解細(xì)胞的形態(tài)及其顯微結(jié)構(gòu)；
2、學(xué)習(xí)顯微測(cè)量的方法，對(duì)細(xì)胞的大小有一直觀認(rèn)識(shí)。
二、實(shí)驗(yàn)材料和儀器：
小白鼠肝細(xì)胞切片；雞血紅細(xì)胞；蠶豆葉片橫切片；
普通光學(xué)顯微鏡；目鏡測(cè)微尺；鏡臺(tái)測(cè)微尺；載玻片；蓋玻片。
三、實(shí)驗(yàn)步驟：
(一)細(xì)胞形態(tài)觀察
l、動(dòng)物細(xì)胞的觀察
�。�1）人肝細(xì)胞切片：在顯微鏡下仔細(xì)觀察肝細(xì)胞的形態(tài)構(gòu)造。
�。�2）雞血細(xì)胞涂片的'觀察：觀察血細(xì)胞的組成；紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板的形態(tài)特點(diǎn)。
2、植物細(xì)胞的觀察
取蠶豆葉片橫切片的觀察：注意表皮細(xì)胞和葉肉細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)。
�。ǘ┘�(xì)胞的大小和測(cè)量
1、卸下目鏡的上透鏡，將目鏡測(cè)微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上，再旋上目鏡的上透鏡。
2、將鏡臺(tái)測(cè)微尺刻度向上放在鏡臺(tái)上夾好，使測(cè)微尺分度位于視野中央。調(diào)焦至能看清鏡臺(tái)測(cè)微尺的分度。
3、小心移動(dòng)鏡臺(tái)測(cè)微尺和轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測(cè)微尺(如目鏡測(cè)微尺分度模糊，可轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡上透鏡進(jìn)行調(diào)焦)，使兩尺左邊的一直線重合，然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。
4、記錄兩條重合線間目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)。按下式計(jì)算目鏡測(cè)微尺每格等于多少μm：
鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)=目鏡測(cè)微尺每格的微米數(shù)x 10/目鏡測(cè)微尺的格數(shù)
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
1、目鏡校正：40倍顯微鏡目鏡測(cè)微尺每格的微米數(shù)=17/70=0.24
2、細(xì)胞大小的測(cè)量：
五、作業(yè)與思考：
1、血細(xì)胞按含量高低，主要含有：紅細(xì)胞，白細(xì)胞，血小板。
白細(xì)胞最大，紅細(xì)胞次之，血小板最小。紅細(xì)胞：主要的功能是運(yùn)送氧。 白細(xì)胞：主要扮演了免疫的角色，當(dāng)病菌侵入人體時(shí)，白細(xì)胞能穿過(guò)毛細(xì)血管壁，集中到病菌入侵部位，將病菌包圍，吞噬。血小板：止血過(guò)程中起著重要作用。細(xì)胞形態(tài)見(jiàn)下圖。
2、植物細(xì)胞一般比動(dòng)物細(xì)胞大一些。形態(tài)圖見(jiàn)下。
3、在不同放大倍數(shù)下，測(cè)定的細(xì)胞大小基本一致，但有一些偏差。放大倍數(shù)越大，在視野中同等實(shí)際距離下的兩點(diǎn)視野距離更大，而更容易測(cè)量準(zhǔn)確。
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 4
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1、學(xué)習(xí)并掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)菌操作技術(shù)。
2、了解原代細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法及操作過(guò)程。
3、學(xué)習(xí)細(xì)胞計(jì)數(shù)及營(yíng)養(yǎng)液的配制。
實(shí)驗(yàn)原理
1、細(xì)胞原代培養(yǎng)
原代細(xì)胞培養(yǎng)是指直接從動(dòng)物體內(nèi)獲取的細(xì)胞、組織和器官，經(jīng)體外培養(yǎng)后，直到第一次傳代為止。這種培養(yǎng)，首先用無(wú)菌操作的方法，從動(dòng)物體內(nèi)取出所需的組織（或器官），經(jīng)消化，分解成單個(gè)游離細(xì)胞，在人工培養(yǎng)下，使其不斷的生長(zhǎng)及繁殖。
細(xì)胞培養(yǎng)是一種操作繁瑣而又要求十分嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)技術(shù)。要使細(xì)胞能在體外長(zhǎng)期生長(zhǎng)，必須滿足兩個(gè)基本要求：一是供給細(xì)胞存活所必須的條件，如適量的水、無(wú)機(jī)鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關(guān)的生長(zhǎng)因子、氧氣、適宜的溫度，注意外環(huán)境酸堿度與滲透壓的調(diào)節(jié)。二是嚴(yán)格控制無(wú)菌條件。
2、細(xì)胞死活鑒定死活細(xì)胞的鑒定方法有很多種，常用的有染色法和儀器分析法。染色法是常用的細(xì)胞死活鑒定方法，簡(jiǎn)便，易于操作。不同的死活細(xì)胞鑒定方法有各自不同具體的反應(yīng)機(jī)理，但無(wú)論采用何種辦法，都是利用了死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的.差異。
染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法，根據(jù)染色機(jī)理的不同，染料或使死細(xì)胞著色，或使活細(xì)胞著色。
死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的差異主要包括：
死活細(xì)胞細(xì)胞膜通透性的差異：活細(xì)胞的細(xì)胞膜是一種選擇性膜，對(duì)細(xì)胞起保護(hù)和屏障作用，只允許物質(zhì)選擇性的通過(guò)；而細(xì)胞死亡之后，細(xì)胞膜受損，通透性增加。常用的以臺(tái)盼藍(lán)鑒別細(xì)胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。臺(tái)盼藍(lán)，又稱(chēng)錐藍(lán)，是一種陰離子型染料，不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜。所以經(jīng)臺(tái)盼藍(lán)染色后只能使死細(xì)胞著色，而活細(xì)胞不被著色。甲基藍(lán)有類(lèi)似的染色機(jī)理。植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離也可鑒定死活。
死活細(xì)胞在代謝上的差異：是采用美藍(lán)染料鑒定酵母細(xì)胞死活的依據(jù)。美藍(lán)是一種無(wú)毒染料，氧化型為藍(lán)色，還原型為無(wú)色。由于活細(xì)胞中新陳代謝的作用，使細(xì)胞內(nèi)具有較強(qiáng)的還原能力，能使美藍(lán)從藍(lán)色的氧化性變?yōu)闊o(wú)色的還原型，因此美藍(lán)染色后活的酵母細(xì)胞無(wú)色；而死細(xì)胞或代謝緩慢的老細(xì)胞，則因它們的無(wú)還原能力或還原能力極弱，使美藍(lán)處于氧化態(tài)，從而被染成藍(lán)色或淡藍(lán)色。
除此之外，還有一些細(xì)胞器的專(zhuān)有染料。如液泡系的專(zhuān)有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料，可以使活細(xì)胞液泡著紅色，而細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被著色；死細(xì)胞的液泡不被著色或淺染，染料彌散于整個(gè)細(xì)胞中，細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)被染成紅色。有時(shí)侯為了增加染色效果可以將兩種染料結(jié)合使用，如甲基藍(lán)-中性紅混合染色法。
實(shí)驗(yàn)用品
1、材料小白鼠
2、試劑
臺(tái)盼藍(lán)、伊紅、PBS緩沖液、細(xì)胞培養(yǎng)液（含生長(zhǎng)因子）
3、器材
剪子、棉球、75%酒精、移液槍、無(wú)菌操作臺(tái)、正置光學(xué)顯微鏡、倒置光學(xué)顯微鏡、解剖盤(pán)、滴管、離心管、離心機(jī)、注射器、Eppendorf管、培養(yǎng)皿、酒精燈、塑料培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板
實(shí)驗(yàn)步驟
1、取材
取小鼠一只，采用斷頭法處死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min，取出轉(zhuǎn)入超凈工作臺(tái)內(nèi)的解剖盤(pán)中，無(wú)菌操作打開(kāi)腹腔，取出其脾臟，除去其周?chē)闹窘M織，并用PBS液自上而下淋洗1-2次，轉(zhuǎn)入無(wú)菌培養(yǎng)皿中待用。
2、分離脾細(xì)胞
用滴管向培養(yǎng)皿中注入30滴PBS緩沖液，再用“L”型針頭注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾臟，注射時(shí)沿長(zhǎng)軸注射。然后再用針頭在脾臟上扎眼，并用“L”型針頭輕輕刮出脾細(xì)胞。在均勻吹勻脾臟細(xì)胞。
吸取上述分離的單個(gè)脾細(xì)胞懸液，放入Eppendorf管中，使量至1mL，以1000r/min離心5min。3培養(yǎng)脾細(xì)胞
取塑料培養(yǎng)皿一套，用移液槍吸取培養(yǎng)液2mL加入塑料皿中，并將皿標(biāo)記待用。取離心后的Eppendorf管，棄去上清液，用移液槍?zhuān)?00ul）吸取塑料皿中的培養(yǎng)液400ul加入棄去上清的Eppendorf管中，用槍頭吹勻管底的脾細(xì)胞，吸取200ul脾細(xì)胞懸液接種于上述塑料皿中，混勻后放入37°C，5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4、配制染液
用生理鹽水配成5%臺(tái)盼藍(lán)染液，備用。
5、染色
取0.5mL細(xì)胞懸濁液放入試管中，加入1-2滴染液�；旌�。2-5min后將細(xì)胞放在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上觀察死活情況，注意不要有
氣泡產(chǎn)生，放大倍數(shù)為10x10。染色后活細(xì)胞不著色，死細(xì)胞顯示藍(lán)色。注意染色時(shí)間不能超過(guò)15min，否則染液將細(xì)胞毒殺。
6、計(jì)數(shù)
在10x10倍的顯微鏡下觀察，計(jì)算血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的4個(gè)4小方格的細(xì)胞數(shù)量。包括細(xì)胞總數(shù)與死細(xì)胞數(shù)量。壓線者計(jì)上不計(jì)下，計(jì)左不計(jì)右。
7、計(jì)算細(xì)胞活力
根據(jù)公式：細(xì)胞活力=(總細(xì)胞數(shù)-死細(xì)胞數(shù))/總細(xì)胞數(shù)x100%
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
臺(tái)盼藍(lán)染色后的細(xì)胞（10x10）伊紅染色后的細(xì)胞（10x10）
總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞數(shù)統(tǒng)計(jì)表（10x10）
項(xiàng)目自己培養(yǎng)細(xì)胞老師培養(yǎng)細(xì)胞總細(xì)胞數(shù)個(gè)/ml活細(xì)胞數(shù)個(gè)/ml細(xì)胞活力1.4x1067.5x1053.0x1055.5x10521.4%73.3%分析與討論
1、結(jié)果分析
本次實(shí)驗(yàn)中我們小組自己培養(yǎng)細(xì)胞所測(cè)細(xì)胞活力為21.4%，并不算高，分析得應(yīng)有以下原因可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果（包括誤差）：
�、湃粼跓o(wú)菌操作的過(guò)程中操作不規(guī)范，導(dǎo)致染菌，會(huì)極大的影響觀察，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。
�、迫粼陔x心分離呈單細(xì)胞的過(guò)程中離心機(jī)轉(zhuǎn)速過(guò)快或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)很可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞破裂，導(dǎo)致小鼠脾細(xì)胞大量死亡。
�、侨旧珪r(shí)間過(guò)長(zhǎng)，或觀察時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都會(huì)導(dǎo)致染色試劑將細(xì)胞殺死，使細(xì)胞活力驟降，這是導(dǎo)致細(xì)胞活力比較低的重要原因。
⑷實(shí)驗(yàn)中的一些操作不正確或不規(guī)范的情況、計(jì)算帶來(lái)的誤差等也會(huì)直接導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)誤差。
2、注意事項(xiàng)
�、艊�(yán)格進(jìn)行動(dòng)物消毒，需用75%酒精消毒。
�、茋�(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，防止細(xì)菌、霉菌、支原體污染，避免化學(xué)物質(zhì)污染。
�、俏∫后w前，瓶口和吸管硬行火焰消毒；吸取液體時(shí)，避免碰撞。
�、入x心管入臺(tái)前，管口、管壁應(yīng)消毒。
�、蓪�(shí)驗(yàn)者離開(kāi)超凈臺(tái)時(shí)，要隨時(shí)用肘部關(guān)閉工作窗。
⑹器材使用時(shí)既要注意用火焰消毒，又要防止?fàn)C傷、燙死細(xì)胞。
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